革蘭染色是什麼順序
革蘭染色正確順序:1、塗片固定;2、草酸銨結晶紫染1分鐘;3、蒸餾水沖洗;4、加碘液覆蓋塗面,染約1分鐘;5、水洗,用吸水紙吸去水分;6、加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脱色,20秒後水洗,吸去水分;7、蕃紅染色液(稀)染1分鐘後,蒸餾水沖洗;8、乾燥,鏡檢。
革蘭染色步驟正確順序
革蘭氏染色是用來鑑別細菌的一種方法:這種染色法利用細菌細胞壁上的生物化學性質不同,可將細菌分成兩類,即革蘭氏陽性與革蘭氏陰性。這一染色方法由丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭於1884年所發明,最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係。
原理:通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇或丙酮脱色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色。
而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脱色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脱色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
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