dtt試劑的作用
dtt是二硫蘇糖醇,是一種小分子有機還原劑,全英文是Dithiothreitol,簡稱為DTT,化學式為C4H10O2S2,又被稱為1,4-二硫蘇糖醇、二硫代蘇糖醇、Cleland試劑。
DTT簡介
DTT的還原性非常強,但是容易被空氣氧化,所以穩定性比較差。其還原性很大程度上是由於其氧化狀態六元環(含二硫鍵)的構象穩定性。它的氧化還原電勢在pH為7時為-0.33伏。DTT的還原力受pH值的影響,只在pH值大於7的情況下能夠發揮還原作用。這是因為只有脫去質子的硫醇鹽負離子(-S–)才具有反應活性,硫醇(-SH)則沒有;而巰基的pKa一般為~8.3。
應用
DTT的用途之一是作為巰基化DNA的還原劑和去保護劑。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向於形成二聚體,特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯反應實驗(如DNA在生物感應器中的固定)的效率;也常常被用於蛋白質中二硫鍵的還原,可用於阻止蛋白質中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質分子內或分子間二硫鍵。
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