逆轉錄的基本過程

原理：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，採用Oligo或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。過程：在逆轉錄酶作用下以dNTP為底物，RNA為模板，tRNA為引物。

按5′→3′方向，合成一條與RNA模板互補的DNA單鏈。然後它與RNA模板形成RNA DNA雜交體，隨後又在反轉錄酶的作用下，水解掉RNA鏈，再以此DNA為模板合成第二條DNA。逆轉錄過程是病毒的複製形式之一，如RNA病毒中的逆轉錄病毒，DNA病毒中的嗜肝DNA病毒和花椰菜花葉病病毒的複製均需要經過逆轉錄。

逆轉錄過程在真核細胞中也同樣存在，例如逆轉座子和端粒DNA的延長均存在逆轉錄過程，需逆轉錄酶的催化。逆轉錄過程的揭示是分子生物學研究中的重大發現，是對中心法則的重要修正和補充。

人們通過體外模擬該過程，以樣本中提取的mRNA為模板，在逆轉錄酶的作用下，合成出互補的cDNA，構建cDNA文庫，並從中篩選特異的目的基因。該方法已成為基因工程技術中最常用的獲得目的基因的策略之一。