hepes緩衝液的配製 hepes緩衝液的配製 ph7.4
hepes緩衝液的配製方法是:準確稱取HEPES 2.383g,加入新鮮三蒸水定容至1L。過濾除菌,分裝後4℃保存(用於加入細胞培養液中作緩衝劑時,培養液需要避光保存)。Hepes緩衝液的用途:對細胞無毒性作用。Hepes緩衝液是一種氫離子緩衝劑,能較長時間控制恆定的pH範圍。使用終濃度為10-50mmol/L,培養液內含20mmol/LHEPES即可達到緩衝能力。
配製方法如下:
1、500ml 1 M Hepes,pH=7.0 Stock solution的配製。
119.15 g Hepes溶解在400ml蒸餾水中,加0.5~1M的NaOH水溶液調節至所需pH(Hepes的有效pH範圍是6.8~8.2),然後用蒸餾水定容至500ml,於4攝氏度保存。
2、加少量鹽的HEPES Buffer配方(500ml)。
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH水溶液調節pH值,最後定容。
3、2×Hepes緩衝鹽溶液的配製。
將1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4、2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g Hepes溶解在90ml的蒸餾水,用0.5M NaOH調節至所需pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。
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